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genetargetsolutions電動大腸桿菌

更新時(shí)間:2019-12-27      點(diǎn)擊次數(shù):1614

genetargetsolutions電動大腸桿菌

TransforMax™EPI300™電動大腸桿菌

應(yīng)用領(lǐng)域

  • 使用CopyControl™克隆系統(tǒng)生成可誘導(dǎo)的拷貝數(shù)克隆。
TransforMax™EPI300™  大腸桿菌  細(xì)胞缺少  tonA  基因,經(jīng)過改造可與Epicentre的CopyControl™cDNA,基因和PCR克隆試劑盒以及其他不需要噬菌體T1抗性細(xì)胞的CopyControl克隆系統(tǒng)一起使用。細(xì)胞包含可誘導(dǎo)的突變體  trfA  基因,其基因產(chǎn)物是從ori V 復(fù)制起點(diǎn)開始復(fù)制所必需的  ,例如在CopyControl pCC1™載體中。在LB氯霉素平板上或在補(bǔ)充氯霉素的LB或SOC培養(yǎng)基中,在TransforMax EPI300 大腸桿菌中生長的CopyControl克隆   從F因子復(fù)制子以單拷貝數(shù)復(fù)制,因?yàn)?em>trfA的表達(dá)  基因被抑制。加入CopyControl誘導(dǎo)溶液可誘導(dǎo)細(xì)胞表達(dá)  trfA  基因產(chǎn)物,并誘導(dǎo)其從ori V 以高拷貝數(shù)復(fù)制  (圖1)。從ori V 復(fù)制可  產(chǎn)生更高的產(chǎn)量和更高的克隆DNA純度。好處

 

  • 克隆的拷貝數(shù)受到與trfA  基因連接的誘導(dǎo)型啟動子的嚴(yán)格控制  。
  • 具有各種大小的克隆的高轉(zhuǎn)化效率。
  • lacZΔM15  用于重組體的藍(lán)/白篩選。
  • 限制-負(fù)[ mcrA,Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)]表型能夠有效克隆甲基化DNA。
  • 核酸內(nèi)切酶負(fù)號(endA1),以確保高產(chǎn)量的DNA。
  • 重組減號(recA1),用于較大插入片段克隆的更高穩(wěn)定性。
 
 

基因型

F- mcrAΔ(mrr-hsdRMS-mcrBC)Φ80dlacZΔM15ΔlacX74recA1 endA1 araD139Δ(ara,leu)7697 galU galKλ-rpsL(StrR)nupG trfA dhfr

TransforMax EPI300電  感受態(tài)大腸桿菌

  • pUC19的轉(zhuǎn)化效率> 1 x 1010 cfu / µg。

TransforMax EPI300具有化學(xué)活性的  大腸桿菌

  • pUC19的轉(zhuǎn)化效率> 5 x 108 cfu / µg。

 

圖1.在TransforMax™EPI300™ 大腸桿菌中, 可以將CopyControl™BAC克隆的拷貝數(shù)誘導(dǎo)10到20倍  。加入CopyControl誘導(dǎo)溶液后,來自CopyControl BAC克隆的110-145 kb BAC DNA的產(chǎn)量增加了14倍以上。U =未誘導(dǎo)的細(xì)胞;I =誘導(dǎo)的細(xì)胞。

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TransforMax™EPI300™電動大腸桿菌

  
EC30011010 X 100微升
EC30015050 X 100微升

包括CopyControl™誘導(dǎo)溶液和pUC19對照DNA。

TransforMax™EPI300™具有化學(xué)活性的大腸桿菌

C300C10510 X 50微升

包括CopyControl™誘導(dǎo)溶液和pUC19對照DNA。

CopyControl™感應(yīng)解決方案

CCIS12525毫升

1,000X濃縮溶液。過濾器已消毒。

 

 

 

 

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